Osteoartrit (OA) 65 ýaşdan geçen garry ilata täsir edýän uzak möhletli dowamly degeneratiw süňk bogun keselleriniň biridir.
1]. Adatça, OA hassalaryna zeper ýeten kıkyrdak, çişen sinowium we agyry we fiziki kynçylyklary döredýän kondrositler ýokaşýar [
2]. Artrit agyry, esasan, çişme bilen bogunlarda kıkyrdagyň zeperlenmeginden döreýär we kıkyrtyk agyr zeper ýeten süňkler biri-biri bilen çaknyşyp, çydap bolmajak agyrylara we fiziki kynçylyklara sebäp bolup biler [
3]. Agyry, çişmek we bogunyň berkligi ýaly alamatlar bilen çişiriji araçylaryň gatnaşmagy gowy görkezilen. OA hassalarynda sinowial suwuklykda kıkyrdagyň we subkondral süňküň eroziýasyna sebäp bolýan çişiriji sitokinler bar [
4]. OA hassalarynyň köplenç iki sany esasy nägileligi agyry we sinowial çişme. Şonuň üçin häzirki OA bejergisiniň esasy maksatlary agyryny we çişmegi peseltmekdir. [
5]. Bar bolan OA bejergileri, şol sanda steroid däl we steroid dermanlary agyryny we çişmegi ýeňilleşdirmegiň netijeliligini subut eden hem bolsa, bu dermanlaryň uzak wagtlap ulanylmagy ýürek-damar, aşgazan-içege we böwrek ýetmezçiligi ýaly saglyga agyr täsir edýär [
6]. Şeýlelik bilen, osteoartrit keselini bejermek üçin has az zyýanly has täsirli derman döredilmeli.
Tebigy saglyk önümleri howpsuz we aňsat bolmagy üçin has meşhur bolýar [
7]. Adaty koreý dermanlary artrit ýaly birnäçe çişme kesellerine garşy täsirini subut etdi [
8]. Oklendia lappa DC. agyryny aýyrmak we aşgazany köşeşdirmek üçin qi aýlanyşyny güýçlendirmek ýaly dermanlyk aýratynlyklary bilen tanalýar we adatça tebigy analjezik hökmünde ulanylýar [
9]. Öňki habarlarda A. lappanyň çişmä garşy bardygyny görkezýär [
10,
11], analjezik [
12], antikanser [
13] we gastroprotektiki [
14] täsirleri. A. lappanyň dürli biologiki işjeňligi onuň esasy işjeň birleşmelerinden emele gelýär: kostunolid, degidrokostus lakton, dihidrokostunolid, kostuslakton, α-kostol, saussura lakton we kostuslakton [
15]. Öň geçirilen barlaglar, kostunolidiň NF-kB we ýylylyk zarbasy belok ýoluny kadalaşdyrmak arkaly makrofaglara sebäp bolan lipopolisakkaridde (LPS) çişmä garşy häsiýetleri görkezendigini öňe sürýär [
16,
17]. Şeýle-de bolsa, A. lappanyň OA bejergisi üçin bolup biljek işleri derňelmedi. Häzirki gözleg, A. lappanyň (monosodium-ýodoasetat) MIA we sirke kislotasy bilen örtülen gemrijiler modellerini ulanyp, OA garşy bejeriş täsirlerini derňedi.
Monosodium-ýodoasetat (MIA) agyry häsiýetleriniň köpüsini we haýwanlarda OA-nyň patofiziologiki aýratynlyklaryny öndürmek üçin meşhurdyr [
18,
19,
20]. Dyz bogunlaryna sanjym edilende, MIA kondrositleriň alyş-çalşyny bozýar we kıkyrtyk we subkondral süňk eroziýasy, OA-nyň esasy alamatlary ýaly çişme we çişme alamatlaryny döredýär [
18]. Sirke kislotasy bilen ýazylan jogap, çişme agyryny mukdar taýdan ölçäp bolýan haýwanlarda periferiýa agyrysynyň simulýasiýasy hökmünde kabul edilýär [
19]. Syçanjygyň makrofag öýjük çyzygy, RAW264.7, öýjükli çişmä garşy jogaplary öwrenmek üçin giňden ulanylýar. LPS bilen işjeňleşdirilenden soň, RAW264 makrofaglar çişme ýollaryny işjeňleşdirýär we TNF-α, COX-2, IL-1β, iNOS we IL-6 ýaly birnäçe çişiriji araçylary bölüp çykarýar [
20]. Bu gözleg, A. lappanyň OA-a garşy MIA haýwan modelinde, sirke kislotasy bilen örtülen haýwan modelinde we LPS işjeňleşdirilen RAW264.7 öýjüklerinde anti-nositeptiw we çişmä garşy täsirlerine baha berdi.
2. Materiallar we usullar
2.1. Ösümlik materiallary
A. lappa DC-iň guradylan kökü. synagda ulanylan Epulip Pharmaceutical Co., Ltd. (Seul, Koreýa) satyn alyndy. Ösümlik farmakologiýasy kafedrasy, Gaçon uniwersitetiniň Koreýa lukmançylygy polkownigi, professor Donghun Li tarapyndan kesgitlenildi we talon nusgasynyň belgisi 18060301 hökmünde goýuldy.
2.2. A. lappa ekstraktynyň HPLC derňewi
A. lappa refleks enjamy (distillendirilen suw, 3 ° 100 ° C) ulanylyp alyndy. Çykarylan ergin pes basyşly bugardyjy bilen süzüldi we kondensirlendi. A. lappa ekstrakty −80 ° C-den doňan guradylandan soň 44,69% hasyl berdi. A. lappanyň hromatografiki derňewi 1260 InfinityⅡ HPLC ulgamyny (Agilent, Pal Alto, CA, ABŞ) birikdirilen HPLC bilen geçirildi. Hromatiki bölünişik üçin 35 ° C-de EclipseXDB C18 sütüni (4,6 × 250 mm, 5 µm, Agilent) ulanyldy. Jemi 100 mg nusga 10 ml 50% metanolda suwuklandyryldy we 10 minut sonikasiýa edildi. Nusgalar 0,45 mkm bolan şpris süzgüji (Waters Corp., Milford, MA, ABŞ) bilen süzüldi. Göçme fazanyň düzümi 0,1% fosfor kislotasy (A) we asetonitril (B) bolup, sütün aşakdaky ýaly çykaryldy: 0–60 min, 0%; 60–65 min, 100%; 65–67 min, 100%; 67–72 min, akym tizligi 1,0 ml / min bolan 0% çözüji B. Akym 210 nm-de 10 μL sanjym mukdary bilen syn edildi. Derňew üç nusgada geçirildi.
2.3. Haýwanlaryň ýaşaýyş jaý we dolandyryş
Erkek Sprague - Dawli (SD) syçanlar 5 hepdelik we 6 hepdelik erkek ICR syçanlar Samtako Bio Koreýadan (Gyeonggi-do, Koreýa) satyn alyndy. Haýwanlar hemişelik temperaturany (22 ± 2 ° C) we çyglylygy (55 ± 10%) we 12/12 sagadyň ýeňil / garaňky aýlawyny ulanyp, bir otagda saklandy. Synag başlamazdan bir hepde gowrak wagt bäri haýwanlar bu ýagdaý bilen tanyşdylar. Haýwanlarda iýmit we suw mahabaty bardy. Gachon uniwersitetinde (GIACUC-R2019003) haýwanlara ideg etmek we işlemek boýunça häzirki etiki düzgünler haýwanlaryň synag synaglarynyň hemmesinde berk berjaý edildi. Gözleg derňewçi kör we paralel synag üçin düzüldi. Haýwanlaryň tejribe etikasy komitetiniň görkezmelerine laýyklykda ewtanaziýa usulyna eýerdik.
2.4. MIA sanjym we bejermek
Alakalar tötänleýin 4 topara bölündi, ýagny şam, gözegçilik, indometasin we A. lappa. 2% izofluorane O2 garyndysy bilen anestizasiýa edilenden soň, syçanlara 50 μL MIA (40 mg / m; Sigma-Aldrih, Sent-Luis, MO, ABŞ) dyz bogunlaryna eksperimental OA getirmek üçin sanjym edildi. Bejergi aşakdaky ýaly geçirildi: gözegçilik we galp toparlar diňe AIN-93G esasy iýmit bilen saklandy. Diňe indometasin toparyna AIN-93G dietasyna goşulan indometasin (3 mg / kg) berildi we A. lappa (300 mg / kg) bilen doldurylan AIN-93G dietasyna A. lappa 300 mg / kg topary bellendi. Bejergiler, OA induksiýa gününden başlap, her gün 190–210 gr beden agramyna 15–17 g derejesinde dowam etdirildi.
2.5. Agramy ölçemek
OA induksiýasyndan soň, syçanlaryň arka agzalarynyň agyrlyk göterijiligini ölçemek, meýilnama boýunça ukypsyzlyk-MeterTester600 (IITC Life Science, Woodland Hills, CA, ABŞ) bilen geçirildi. Arka ellerdäki agram paýlanyşy hasaplandy: agram göterijilik ukyby (%)
