Şem we sabyn üçin arassa Sapoşnikowiýa divaricata ýagy, gamyş ýakýan diffuzorlar üçin lomaý diffuzor efir ýagy

gysga düşündiriş:

2.1. SDE taýýarlamak

SD kökleri Hanherb Co. (Guri, Koreýa) guradylan ösümlik hökmünde satyn alyndy. Ösümlik materiallaryny Koreýa Gündogar lukmançylyk institutynyň (KIOM) doktor Go-Ya Choi taksonomiki taýdan tassyklady. Talon nusgasy (2014 SDE-6 belgisi), adaty ösümlik baýlyklarynyň Koreýa gerbariýinde saklandy. SD (320 g) guradylan rizomlar 70% etanol bilen (2 sagat refleks bilen) iki gezek çykaryldy we ekstrakt soňra pes basyşda jemlendi. Eriş süzüldi, lýofilizasiýa edildi we 4 ° C derejesinde saklandy. Çig başlangyç materiallardan guradylan ekstraktyň hasyly 48,13% boldy (w / w).

2.2. Mukdar ýokary öndürijilikli suwuk hromatografiýa (HPLC) derňewi

Hromatografiki derňew HPLC ulgamy (Waters Co., Milford, MA, ABŞ) we fotodiod massiw detektory bilen geçirildi. SDE-iň HPLC derňewi üçin, ilkinji-O-glucosylcimifugin standarty, adaty lukmançylyk senagaty üçin Koreýa mahabat institutyndan (Gyeongsan, Koreýa) wesek-glucosylhamaudol we 4′-O-β-D-glýukozil-5-O-Metilwisamminol laboratoriýamyzda izolýasiýa edildi we spektral analizler bilen kesgitlenildi, esasanam NMR we MS.

SDE nusgalary (0,1 mg) 70% etanolda (10 ml) eritildi. Hromatografiki bölünişik XSelect HSS T3 C18 sütüni bilen (4,6 × 250 mm, 5)μm, Waters Co., Milford, MA, ABŞ). Göçme faza 1,0 ml / min akym tizliginde asetonitril (A) we suwdaky 0,1% sirke kislotasyndan (B) ybaratdy. Köp basgançakly gradient programmasy aşakdaky ýaly ulanyldy: 5% A (0 min), 5–20% A (0-10 min), 20% A (10–23 min), we 20–65% A (23-40 min) ). Ectionüze çykaryş tolkun uzynlygy 210–400 nm skanerden geçirildi we 254 nm-de hasaba alyndy. Sanjymyň mukdary 10.0 boldyμL. Üç hromony kesgitlemek üçin standart çözgütler iň soňky konsentrasiýasynda 7,781 mg / mL (prim-O-glucosylcimifugin), 31.125 mg / mL (4′-O-β-D-glýukozil-5-O-metilwisamminol), we 31.125 mg / mL (sek-glucosylhamaudol) metanolda we 4 ° C derejesinde saklanýar.

2.3. Lamokançlyga garşy işjeňlige baha bermekWitroda

2.3.1. Öýjük medeniýeti we nusga bejergisi

RAW 264.7 öýjükleri Amerikan görnüşiniň medeni ýygyndysyndan (ATCC, Manass, VA, ABŞ) alyndy we 1% antibiotikleri we 5,5% FBS bolan DMEM gurşawynda ösdürildi. Öýjükler 37 ° C-de 5% CO2 çygly atmosferada inkubasiýa edildi. Öýjükleri höweslendirmek üçin serişde täze DMEM gurşawy we lipopolisakarid (LPS, Sigma-Aldrih Himiki Co., Sent-Luis, MO, ABŞ) bilen çalşyryldyμg / mL SDE (200 ýa-da 400) barlygynda ýa-da ýoklugynda goşuldyμg / mL) goşmaça 24 sag.

2.3.2. Azot oksidini () OK), Prostaglandin E2 (PGE2), çiş nekroz faktoryny kesgitlemek-α(TNF-α) we Interleukin-6 (IL-6) Önümçilik

Öýjükler SDE bilen bejerildi we 24 sagat LPS bilen gyjyndyryldy. Öňki gözleglere görä Griess reagentini ulanyp nitrit ölçemek bilen hiç bir önüm analiz edilmedi [12]. PGE2, TNF- çişiriji sitokinleriň bölünip çykmagyαwe IL-6 öndürijiniň görkezmesine laýyklykda ELISA toplumyny (R&D ulgamlary) ulanmak arkaly kesgitlenildi. SDE-iň NOOK we sitokiniň önümçiligine edýän täsiri Wallac EnVision ulanyp 540 nm ýa-da 450 nm-de kesgitlenildi™mikroplat okyjy (PerkinElmer).

2.4. Antiosteoartrit işjeňligine baha bermekVivo-da

2.4.1. Haýwanlar

Erkek Sprague-Dawley alakalary (7 hepde) Samtako Inc.-den (Osan, Koreýa) satyn alyndy we 12 sagatlyk ýagtylyk / garaňky aýlawly gözegçilik şertlerinde ýerleşdirildi.° C we% çyglylyk. Alakalar laboratoriýa dietasy we suw bilen üpjün edildimahabat kitaphanasy. Synag amallarynyň hemmesi Milli Saglyk Institutlarynyň (NIH) görkezmelerine laýyklykda geçirildi we Daejeon uniwersitetiniň Haýwanlara ideg we peýdalanmak komiteti (Daejeon, Koreýa respublikasy) tarapyndan tassyklandy.

2.4.2. Düwürtiklerde OIA bilen induksiýa

Haýwanlar tötänleýin tertipleşdirilip, barlag başlamazdan ozal bejeriş toparlaryna bellendi (toparyna). MIA çözgüdi (3 mg / 50)μL 0,9% duzly) ketamin bilen ksilaziniň garyndysy bilen ýüze çykan anesteziýanyň aşagyndaky sag dyzyň içerki giňişligine göni sanjym edildi. Alakalar tötänleýin dört topara bölündi: (1) MIA sanjymy bolmadyk duzly topar, (2) MIA sanjymy bilen MIA topary, (3) MIA sanjymy bilen SDE bejergisi topary (200 mg / kg) we (4) ) indometasin- (IM-) bejergisi topary (2 mg / kg) MIA sanjymy bilen. Alakalar 4 hepde MIA sanjymyndan 1 hepde öň SDE we IM bilen dilden berildi. Bu gözlegde ulanylan SDE we IM-iň dozasy öňki gözleglerde işleýänlere esaslandy [10,13,14].

2.4.3. Hindpaw agram göterijiniň paýlanyşy

OA induksiýasyndan soň, arka aýaklarynyň agyrlyk göterijilik ukybynyň asyl deňagramlylygy bozuldy. Agyrlyk çydamlylygynyň üýtgemegine baha bermek üçin ukypsyzlyk synagy (Linton gurallary, Norfolk, Angliýa) ulanyldy. Alakalar ölçeg kamerasyna seresaplylyk bilen ýerleşdirildi. Arka eliň agyrlygy göteriji güýji ortaça 3 s döwürde ortaça boldy. Agram paýlanyş gatnaşygy aşakdaky deňleme bilen hasaplandy: [sag arka agzadaky agram / (sag arka agzadaky agram + çep arka aýagyňyzdaky agram)] × 100 [15].

2.4.4. Serum sitokiniň derejelerini ölçemek

Ganyň nusgalary 4 ° C-de 10 minut üçin 1500 gr sentrifugasiýa edildi; soň serum ýygnaldy we ulanylýança −70 ° C derejesinde saklandy. IL-1 derejeleriβ, IL-6, TNF-αwe serumdaky PGE2 öndürijiniň görkezmesine laýyklykda R&D Systems (Minneapolis, MN, ABŞ) ELISA toplumlary bilen ölçenildi.

2.4.5. Hakyky mukdarda RT-PCR derňewi

Jemi RNK, TRI reagentini (Sigma-Aldriç, Sent-Luis, MO, ABŞ) ulanyp, dyz bogun dokumalaryndan alyndy, SYBR ýaşyl (amaly biosistemalar) bilen TM One Step RT PCR toplumyny ulanyp, CDNA tersine we PCR güýçlendirilen. , Grand Island, NY, ABŞ). Hakyky mukdarda PCR amaly biosistemalar 7500 Real-wagt PCR ulgamy (amaly biosistemalar, Grand Island, NY, ABŞ) ulanylyp ýerine ýetirildi. Astar yzygiderliligi we gözleg yzygiderliligi Jetwelde görkezilýär1. Öndürijiniň görkezmelerine laýyklykda (amaly biosistemalar, Foster, CA, ABŞ) TaqMan® Universal PCR baş garyndysy bilen DNK polimerazyny öz içine alýan CDNA nusgalary we deň mukdarda GAPDH cDNA güýçlendirildi. PCR şertleri 50 ° C-de 2 minut, 94 ° C-de 10 minut, 95 ° C-de 15 s we 40 aýlaw üçin 60 ° C-de 1 minut boldy. Maksatly geniň konsentrasiýasy öndürijiniň görkezmelerine laýyklykda deňeşdirme Ct (güýçlendirme meýdançasy bilen bosaganyň arasyndaky kesiş nokadyndaky san belgisi) usuly bilen kesgitlenildi.

FOB bahasy:ABŞ-nyň 0,5 - 9,999 / bölegi

Min.Order mukdary:100 bölek / bölek

Üpjünçilik ukyby:Aýda 10000 bölek / bölek

Bize e-poçta iberiň

Önümiň jikme-jigi

Haryt bellikleri

Osteoartrit (OA) myşsa-skelet bozulmasy we garrylarda iň köp ýaýran degeneratiw bogun keselidir [1]. OA bölekleýin şikes, kıkyrtyk gurluşynyň we işleýşiniň ýitmegi, proýflammatiki we çişmä garşy ýollaryň tertipsizligi sebäpli ýüze çykýan ýagdaýdyr [2,3]. Ilki bilen sinowial bogunlaryň artikulýar kıkyrdagyna we subkondral süňküne täsir edýär we bogun näsazlygyna sebäp bolýar, agyrlyk götermekde agyrylara sebäp bolýar, ýöremek we durmak [4].

OA-nyň bejergisi ýok, sebäbi kıkırdagy ýok edilenden soň dikeltmek gaty kyn [5]. Bejerginiň maksatlary agyryny aýyrmak, bogun hereketini saklamak ýa-da gowulaşdyrmak, bogunlaryň güýjüni ýokarlandyrmak we keseliň täsir ediji täsirlerini azaltmakdyr. OA-nyň farmakologiki bejergileri hassanyň bilelikdäki işini we durmuş derejesini ýokarlandyrmak üçin agyryny azaltmagy maksat edinýär. Garynjanyň ýok edilmegi OA-da esasy waka bolsa-da, kollageniň zaýalanmagy, OA-nyň çişme bilen baglanyşykly yzyna dolanyp bolmajak ösüşini kesgitleýän esasy waka bolup durýar [6,7]. Inflamokançlyga garşy we kondroprotektiki işjeňlik bilen bejergiler, agyryny aýyrar we OA hassalarynda matrisa bitewiligini saklar diýlip garaşylýar.

Şol sebäpli, çişmegi azaltmak OA dolandyryşynda peýdaly bolar. Soňky gözlegler, kondrositleriň çişmegini azaltmak we kıkyrdagyň ýok edilmegi, birleşýän dokumalar bilen täsirleşmek, bogun agyrysyny azaltmak arkaly OA-nyň ösüşi üçin ösümlik çeşmeleri üçin gorag roluny teklip edýär [8].

KökSapoşnikowiýa diarikataŞişkin (Umbelliferae) adaty lukmançylykda Koreýada we Hytaýda kelle agyry, agyry, çişme we artrit bejergisinde giňden ulanylýar [9,10]. Dürli farmakologiki täsirleriSapoşnikowiýa diarikata(SD) çişmä garşy, analjezik, antipiretiki we antiartrit häsiýetlerini hem öz içine alýar [9,11]. Recentaňy-ýakynda geçirilen bir gözleg, SD hromon ekstraktynyň kollagen-öjükdirilen artritiň syçan modelinde potensial antihematoid artrit täsirine eýedigini görkezdi [10]; Şeýle-de bolsa, çişmä garşy we antiartrit işjeňligini goldamak üçin az sanly gözleg geçirildiSapoşnikowiýa diarikataekstrakt (SDE).

Şonuň üçin bu gözleg, SD-nyň 70% etanol ekstraktynyň çişmä garşy we antiosteoartrit işjeňligini derňedi. Ilki bilen SDE-iň çişmä garşy täsiri bahalandyryldyin vitroLPS-induksion RAW 264.7 öýjüklerinde. Ondan soň, SDE-iň antiosteoartrit täsiri, monosodium ýodoasetat- (MIA-) öjükdirilen OA-nyň syçan modelinde agyrlyk göterijiniň paýlanyşyna, artikulýar kıkyrdagyň zaýalanmagyna we çişme täsirlerine baha bermek bilen ölçenildi.